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      實驗案例
      首頁 實驗案例 高通量組織研磨儀對真菌細胞的破壁及DNA提取
      2020/12/21 12:03:21
      高通量組織研磨儀對真菌細胞的破壁及DNA提取
      來源:上海凈信

      實驗目的

      對真菌細胞進行破壁,提取其DNA。

      實驗原理

      隨著分子生物學技術(shù)的進展,PCR相關(guān)方法越來越多地被應用到真菌學研究中來,而真菌DNA的提取是包括分子診斷在內(nèi)的所有實驗的基礎,簡便快捷地提取真菌DNA,且獲得的DNA完整、純度高,對真菌分子生物學的研究有及其重要的意義。

      真菌細胞壁以幾丁質(zhì)、葡萄糖為主構(gòu)成細胞壁骨架,而基質(zhì)則由多糖、甘露聚糖、糖蛋白、脂質(zhì)等填充。絲狀真菌堅韌厚壁的構(gòu)成,需要較為繁瑣的破壁手段,故真菌DNA的提取較細菌或其他組織細胞難度更大。為保證真菌PCR技術(shù)及其相關(guān)分子生物學技術(shù)的順利開展,簡便快捷地提取真菌DNA,且獲得的DNA完整、純度高,是必須解決的前提條件。

      實驗材料和器具

      樣品:真菌類

      儀器:高通量組織研磨儀(上海凈信,Tissuelyser-48)

      耗材:離心管,研磨珠(上海凈信)

      試劑:TE Buffer,DA Buffer,E Binding Buffer,Elution Buffer

      實驗步驟

      需了解具體步驟,請致電廠家

      實驗結(jié)果

      圖1 提取DNA的檢測  M:100bp 標準參照物

      圖2 提取DNA的PCR檢測結(jié)果  M:100bp 標準參照物